🔍产品基础信息
- 货号:EK1F700
- 英文名:Phosphatidylinositol Trisphosphate (PIP3) ELISA Kit-Competitive
- 中文名:磷脂酰肌醇三磷酸(PIP3)ELISA试剂盒-竞争法
- 品牌:Biovenic生物公司
- 规格:96孔板(含预包被抗体、标准品、酶标二抗、底物A/B、终止液、洗涤液等)
- 检测范围:0.1–100 ng/mL(具体以说明书为准)
- 适用样本:血清、血浆、细胞裂解液、组织匀浆液等
- 灵敏度:<5 pg/mL(典型值)
- 应用领域:癌症研究、炎症性疾病、代谢调控、药物开发等
📝详细介绍
1. 产品原理与技术特点
竞争性ELISA技术:
该Phosphatidylinositol Trisphosphate ELISA Kit基于竞争性ELISA原理,样本中的PIP3与酶标PIP3竞争结合预包被的特异性抗体。通过检测底物显色反应的吸光度值,定量分析样本中PIP3浓度。相较于传统夹心法,竞争法更适合低丰度或小分子目标物的检测,显著降低交叉反应风险。
核心技术优势:
- 单克隆抗体:采用高亲和力单抗,确保特异性识别PIP3的特定磷酸化位点(如PI(3,4,5)P3)。
- 宽动态范围:线性检测范围覆盖0.1–100 ng/mL,可满足不同实验需求。
- 抗干扰设计:优化缓冲体系,减少脂类、蛋白聚集体等复杂样本基质的干扰。
2. 核心应用场景
- 癌症研究:PIP3是PI3K/AKT/mTOR通路的关键信号分子,与肿瘤增殖、迁移密切相关。适用于癌症细胞系、肿瘤组织样本的信号通路分析。
- 炎症与免疫调控:检测巨噬细胞、T细胞等免疫细胞中PIP3水平,研究炎症反应机制。
- 代谢性疾病:胰岛素抵抗、肥胖等代谢异常与PIP3信号失调相关,可用于代谢组学研究。
- 药物开发:评估PI3K抑制剂或激活剂的药效,监测治疗过程中PIP3动态变化。
3. 实验流程与操作便捷性
标准实验步骤:
1. 样本处理:血清/血浆样本需离心去除脂质,细胞裂解液需匀浆后超声破碎。
2. 标准曲线建立:使用梯度稀释的PIP3标准品(0.1–100 ng/mL)绘制吸光度-浓度曲线。
3. 样本检测:每孔加入样本或标准品,与酶标PIP3竞争结合抗体,洗板后加入底物显色。
4. 数据分析:通过软件(如GraphPad Prism)计算样本浓度,评估实验重复性(CV<15%)。
操作亮点:
- 预包被板:即用型96孔板,省去抗体包被步骤,缩短实验时间。
- 全封闭体系:减少操作污染风险,适合高通量检测。
- 兼容性广:支持手动或自动化液体处理系统(如Biomek i7)。
🎯核心优势详解
1. 超高灵敏度与精准度
- 检测限低至5 pg/mL:可检测极低浓度的PIP3,适用于微量样本(如单细胞裂解液)。
- 回收率>90%:通过添加已知浓度标准品验证,确保结果可靠性。
- 批间差异<10%:严格质控生产流程,保障不同批次试剂盒性能一致。
2. 严格的质控标准
- 交叉反应测试:与PI(4,5)P2、PI(3,4)P2等类似物无显著交叉反应(<2%)。
- 稳定性验证:4℃保存6个月,活性保持>95%;37℃加速老化7天,性能偏差<10%。
- 重复性实验:同一样本重复检测10次,CV值≤8%。
3. 人性化设计
- 即用型试剂:预混底物A/B、终止液,避免手动配制误差。
- 详细说明书:附实验流程图、常见问题解答(FAQ)及参考文献。
- 环保包装:采用可降解材料,减少实验室废弃物污染。
❓购买常见问题与解答
Q1:该试剂盒是否支持人以外的物种样本?
A:本Phosphatidylinositol Trisphosphate ELISA Kit针对人源PIP3优化,但经验证可兼容小鼠、大鼠样本(需稀释后使用)。其他物种建议先进行预实验。
Q2:样本处理中如何避免PIP3降解?
A:建议添加蛋白酶抑制剂(如PMSF),并在冰上操作。细胞裂解后需立即离心(4℃, 12,000 rpm, 10 min),取上清检测。
Q3:检测高浓度样本时如何操作?
A:若样本浓度超过标准曲线上限(100 ng/mL),需稀释后检测。推荐使用本试剂盒提供的稀释液进行梯度稀释。
Q4:显色后颜色不均匀怎么办?
A:可能因洗板不好或底物混合不均导致。建议增加洗板次数(5次,每次30秒),并充分混匀底物A/B后再加入孔中。
Q5:试剂盒有效期多久?
A:未开封试剂盒有效期为12个月(自生产日起)。开封后建议30天内用完,并避光保存于2–8℃。
Q6:能否用于临床诊断?
A:本产品为科研用途(RUO),不可直接用于临床诊断。临床检测需通过医疗器械认证。
Q7:灵敏度是否受样本基质影响?
A:已通过多种样本基质(血清、血浆、细胞裂解液)验证,灵敏度稳定。但高脂血症样本需预先脱脂处理。
Q8:是否提供技术支持?
A:Biovenic提供全程技术支持,包括实验设计、数据分析及问题解答。
Q9:与其他品牌ELISA试剂盒相比有何优势?
A:Biovenic采用竞争性ELISA技术,特异性更高;同时提供更宽的动态范围和更低的检测限,性价比突出。
Q10:能否检测磷酸酶处理后的样本?
A:若样本经磷酸酶处理(如去磷酸化),PIP3会被降解为IP3,导致检测结果偏低。建议设置阳性对照验证。
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(注:本文内容基于品牌公开资料及行业常规信息整理,具体以品牌信息文档为准。)
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