🔍产品基础信息
货号:125-05061
英文名:Lysyl EndopeptidaseR, Mass Spectrometry Grade (Lys-C)
中文名:赖氨酰肽链内切酶,质谱级
品牌:FUJIFILM Wako(富士胶片和光)
Cas:125-05061
规格:常见为20 μg/支(可组合购买多支装)
储存条件:-20℃干燥保存,避免反复冻融
分子量:约30,000 Da(SDS-PAGE检测)
活性单位:≥0.03 AU/vial(30℃, pH9.5条件下每分钟催化生成1 μmol对硝基苯胺)
📝详细介绍
1️⃣ 来源与特性
Wako Lys-C酶源自无色杆菌(Achromobacter lyticus),通过基因重组技术实现高纯度表达。作为氨酸蛋白酶家族成员,其最适pH为9.0-9.5,等电点6.9-7.0,能在含尿素(4M)或SDS(0.1%)的变性环境中保持稳定活性。
2️⃣ 作用机制
该酶特异性切割赖氨酸(Lys)残基的C端肽键,对邻近氨基酸序列无显著偏好性(如Pro残基可能抑制切割)。与Trypsin联用时,可显著提升蛋白质的酶解覆盖率,尤其适用于膜蛋白、复杂组蛋白等难消化样本。
3️⃣ 应用场景
- 蛋白质组学研究:用于肽段制备,辅助质谱鉴定翻译后修饰(如磷酸化、泛素化)
- 生物制药开发:单克隆抗体铰链区切割、重组蛋白质量控制
- 基因编辑验证:CRISPR相关蛋白的纯化与功能分析
- 交联质谱(XL-MS):解析蛋白质三维结构及相互作用网络
🎯核心优势详解
✅ 高特异性与低自切活性
Lys-C仅识别赖氨酸C端,错误裂解率低于3%(Trypsin单独使用为8%),显著提升质谱数据可靠性。
✅ 低劣条件耐受性
在pH4.0-11.0、30℃环境下稳定保存,50℃以上活性下降但仍优于同类产品。
✅ 灵活的样本兼容性
支持凝胶内酶切、溶液内酶切等多种模式,尤其适合SDS-PAGE胶回收样本的消化。
✅ 批次一致性保障
采用大肠杆菌重组表达技术,通过ISO9001和ISO/IEC17025认证,批间差异<5%。
✅ 经济高效的包装设计
20 μg/支的小包装设计减少浪费,单支可完成100-200个样品的酶切。
❓购买常见问题与解答
Q1:Lys-C与Trypsin联用比例如何确定?
A:推荐比例为1:50(Lys-C:Trypsin),具体需根据样本类型优化。
Q2:酶切后肽段如何纯化?
A:建议使用ZipTip或C18固相萃取柱脱盐,再通过质谱分析。
Q3:能否用于磷酸化蛋白分析?
A:可以!Lys-C不会切割磷酸化位点,是磷酸化研究的理想选择。
Q4:长期保存是否需要添加稳定剂?
A:无需额外添加,冻干粉在-20℃可稳定保存2年。
Q5:与竞品(如Thermo Fisher Lys-C)相比有何优势?
A:Wako Lys-C纯度更高(SDS-PAGE单一条带),且提供更灵活的包装规格。
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(注:本文内容基于品牌公开资料及行业常规信息整理,具体以品牌信息文档为准。)
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