虎克实验室是的自身免疫性疾病实验动物模型及其相关产品研发和生产企业,其创始人Suzana Marusic博士曾在惠氏制药长期担任炎性靶点验证实验室的主管,负责哮喘和自身免疫性疾病的研究,研发制备出高度相似性的哮喘和实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠模型,并以此验证了多个药物靶点。Suzana Marusic凭借其多年来在T细胞分离培养、细胞免疫、外周耐受机制及免疫相关疾病和肿瘤研究的丰富经验,创立了虎克实验动物模型公司,致力于为科研和药物研发提供的自身免疫性实验动物模型建立试剂盒,以及相关的实验动物组织和血清。公司目前的实验动物模型主要包括胶原诱导的关节炎模型、实验性自身免疫性脑脊髓炎模型、系统红斑狼疮、炎性肠病等模型的制备试剂盒,以及多种免疫状态下动物组织和血清样本。虎克实验动物模型提供的模型制备试剂盒以预充免疫原的注射器为主,操作简单,结果可靠,可重复性高。
虎克公司主要产品
一、胶原诱导的类风湿关节炎模型CIA
类风湿关节炎Rheumatoid arthritis (RA)是一种常见的自体免疫性疾病,多见于关节部位,但在心脏结缔组织、血管、肺、眼皮肤及肾脏均有发现。RA发病中女性多余男性(约2:1),其症状包括疼痛、肿胀感和僵硬、粘连、关节面糜烂、骨吸收关节变形甚至失去功能。
虎克实验室在RA实验动物模型的建立上有着丰富的经验,其核心动物模型胶原蛋白诱导的类风湿关节炎模型(CIA)即是常用的类风湿关节炎模型,该模型常用DBA/1小鼠建立,但是也可用B10.R111 小鼠, B10.Q 小鼠及Lewis 大鼠建立。
1、虎克公司提供的CIA模型诱导试剂盒
四种试剂盒区别在使用不同来源的胶原蛋白诱导,斜线后为相应的免疫佐剂。
2、CIA免疫流程
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3、CIA模型评价指标
二、实验性自身免疫性脑脊髓炎模型(EAE)模型
虎克公司精通目前几乎所有常用的EAE 模型,公司创始人Suzana Marusic博士也是过继转移型C57BL/6小鼠EAE模型的。如果需要,还可与客户研发/修正现有的EAE模型。以下是目前虎克公司克提供常用建立EAE模型的方案及试剂盒
(1)MOG/CFA诱导的 C57BL/6小鼠EAE模型
(2)PLP139-151/CFA诱导的SJL小鼠模型
(3)gpMBP69-88/CFA诱导的 Lewis 大鼠模型
(4)Spinal cord homogenate 诱导的EAE模型
(5)过继转移的EAE模型
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1、虎克公司提供的EAE模型诱导试剂盒
2、EAE诱导流程
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3、EAE模型典型指征
三、系统红斑狼疮动物模型Systemic Lupus Erythematosus (SLE)
1、采用MRL/lpr小鼠建立的SLE模型
因MRL/lpr小鼠建立的SLE与临床上SLE相似度高,因此是zui常见用于建立红斑狼疮的动物。虎克公司通常使用11周齡的雌性MRL/lpr小鼠建立SLE模型,如不加处理,该模型一般在17周即可检测到明显的肾脏病变。模型评价指标为每周检测蛋白尿及体重,17周检测脾脏重量,肾脏病理检测、抗dsDNA抗体检测、血液尿素氮(BUN)及血清肌酸检测。下图为典型的以MRL/lpr小鼠建立的SLE模型的指征。
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2、采用(NZB x NZW)F1代杂交小鼠建立的SLE模型
(NZB x NZW)F1代杂交小鼠可发育出与SLE相似的自体免疫性疾病,与人类SLE患者类似,该品系动物有高浓度的抗dsDNA及抗核蛋白、蛋白尿症及免疫复合物肾小球肾炎,因此也是研究SLE的理想动物模型。下图为典型的以(NZB x NZW)F1代杂交小鼠建立的SLE模型的指征。
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四、肠炎动物模型
1、DSS诱导的C57BL/6 小鼠肠炎模型
炎性肠病 (IBD)是人类常见的消化道疾病,右旋糖酐硫酸酯钠(DSS)诱导的IBD模型与临床人类IBD疾病在病理学上有共同特征,如体重减轻,血性腹泻及结肠炎的病理学改变。虎克公司诱导的IBD模型是在连续五天C57BL/6小鼠食水中加入3-4 % 的DSS,造成整个消化道的炎症,但是结肠尤为严重。当DSS停用后急性肠炎转变为慢性肠炎。下图为典型的肠炎动物模型指征。
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2、CD4+CD45RB(高)诱导的SCID小鼠肠炎模型
该疾病模型可能是zui接近人类IBD疾病的动物模型,其病理学反应及体重变化均与临床现象相似,且临床上有效的处理在该动物模型也同样有效。该模型与人类IBD疾病不同之处在于损伤位置不同,小鼠一般局限于结肠,而人类则可发于整个消化道(尽管结肠仍为高发位置)。该动物模型的诱导流程如下。
下图为该模型的*指征:
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五、体外T细胞功能分析
体外脾脏和淋巴结可被抗原反复刺激以分析T细胞产生的细胞因子,该方案常用于重要研究的预实验。分析流程如下:
检测指标如下:
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六、迟发型过敏(DTH)
DTH是一个短期评估药物对细胞免疫反应的常用模型,主要针对Th1 及Th17 细胞。虎克公司制备的DTH模型采用雌性C57BL/6小鼠,用甲基化的牛血清白蛋白乳液(mBSA) 配合福氏佐剂进行免疫获得。该模型耗时短、成本低,通常在用炎性模型如CIA或EAE之前的预实验采用。下图为该模型的*指征。
七、体内脂多糖LPS诱导的炎症模型
在体内注射细菌脂多糖后机体血清中TNF、 IL-6及 IL-1 浓度增高, 可用于类风湿关节炎初步药物筛选,再进一步以CIA模型验证。该模型也是一个耗时短、性价比高的炎性动物模型,在需要CIA等模型研究前作为预实验有相当大潜力。
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八、体外全血LPS刺激
该模型采用Lewis rats,在注射检测物质1-24小时后,动物全血被收集, 其中部分用于分离PK评估,剩余部分用于体外全血的LPS刺激(或其它抗原刺激),接着用ELISA或细胞因子检测(CBA) 。实验流程及典型指征如下图:
九、自身免疫性疾病研究常用抗原、细胞及动物模型样本
1、抗原(溶于细胞培养液中):
MOG35-55、PLP139-151、MBP1-17、OVA323-339 、gpMBP69-88 。
2、用于T细胞培养的胎牛血清:
3、组织和细胞:
(1)EAE动物的脾脏和脊髓,
(2)CIA动物的爪子、脾脏和血清,
(3)SLE(Cyclophosphamide-treated (no or mild proteinuria))动物药物处理及其对照的肾脏和血清
(4)源于MOG35-55、PLP139-151、CFA佐剂对照免疫的小鼠及未免疫小鼠对照的活细胞,包括脾细胞、淋巴节细胞。
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